Ligase rapide d'ADN T4 de construction de bibliothèque de NGS 400 U/UL pour l'usage de recherches SEULEMENT

Ligase rapide d'ADN T4 (400 U/ΜL)

La ligase rapide d'ADN T4 est un produit simple d'enzymes qui peut être employé pour relier les fragments d'ADN et l'adaptateur en cours de construction de bibliothèque de NGS. Le produit a été vérifié par la sortie élevée ordonnançant et a l'excellente qualité. Cette enzyme a une capacité de ligature très efficace, qui est très appropriée à la ligature des fragments acides nucléiques complexes, tels que l'adaptateur de Ω de la plate-forme de MGI. On lui recommande de choisir le module de ligature d'ADN de dernière syllabe d'un mot de Hieff NGSTM (Cat#12604) dont le composant de noyau est ligase rapide d'ADN T4 pour les clients qui n'ont pas besoin de l'ajustement de système.

L'information produit

Description de produit au sujet de ligase rapide d'ADN T4

La ligase rapide d'ADN T4 est un produit simple d'enzymes qui peut être employé pour relier les fragments d'ADN et l'adaptateur en cours de construction de bibliothèque de NGS. Le produit a été vérifié par la sortie élevée ordonnançant et a l'excellente qualité. Cette enzyme a une capacité de ligature très efficace, qui est très appropriée à la ligature des fragments acides nucléiques complexes, tels que l'adaptateur de Ω de la plate-forme de MGI. On lui recommande de choisir Hieff NGSLE TMModule de ligature d'ADN de dernière syllabe d'un mot (Cat#12604) dont le composant de noyau est ligase rapide d'ADN T4 pour les clients qui n'ont pas besoin de l'ajustement de système.

Composants de produit de ligase rapide d'ADN T4

Instructions

1. Les kits de construction actuels de bibliothèque d'ADN de courant principal ne sont pas généralement épurés après la réparation de fin et le traitement d'Un-produit de queue, et effectuent directement la ligature d'adaptateur. Veuillez se référer à la préparation suivante pour le système de réaction. Le vortex complètement, tournent brièvement et incuber pour la minute 15 à 20°C.

[Note] : la CHEVILLE 6000 de *50% n'est pas fournie dans le kit, vous doit le préparer par vous-même.

** Référez-vous à la table suivante pour la quantité d'adaptateur.

Le *** la quantité de ligase rapide d'ADN T4 utilisée peut être le μL 1-5 supplémentaire comme nécessaire.

2. La qualité et la concentration des adaptateurs utilisés directement affectent l'efficacité de ligature et le rendement de bibliothèque. Trop d'utilisation d'adaptateur peut produire plus de dimères d'adaptateur, alors que l'utilisation inférieure peut affecter l'efficacité de ligature et le rendement de bibliothèque. Le tableau suivant présente la quantité recommandée d'adaptateur utilisée dans différentes situations d'ADN d'entrée utilisant ce kit.

[Note] : Entrée ADN taupe (pmol) ≈ entre ADN) (de NG/[0,66 longueurs de moyenne d'ADN d'entrée de × (point d'ébullition)].

Exemple de calcul de ligature d'adaptateur : Combien d'adaptateur devrait être ajouté quand l'ADN d'entrée est 100 NG et la longueur est le point d'ébullition 300 ?

Étape 1 : Calculez le nombre de moles d'ADN d'entrée. Formule : Entrée ADN taupe (pmol) ≈ entre ADN) (de NG/[0,66 longueurs de moyenne d'ADN d'entrée de × (point d'ébullition)]; ÷ =100 de taupe d'ADN d'entrée (pmol) (0.66×300) = 0,5 pmol ;

Étape 2 : Selon la table ci-dessus, calculez le nombre de taupes d'adaptateur supplémentaires. ; Quand l'ADN d'entrée est 100ng, le rapport molaire des adaptateurs : l'ADN d'entrée est 100:1, et le nombre de taupes de pmol des adaptateurs added=100×0.5 pmol=50 ;

Étape 3 : Calculez le volume d'addition d'adaptateur. Concentration en adaptateur = 15 μmol/L (si vous utilisez l'adaptateur de l'autre société, vous devez déterminer sa concentration selon ses instructions) ; Le volume de l'adaptateur supplémentaire = des taupes d'adaptateur a ajouté (la concentration en ÷ de pmol 50) de l'adaptateur (μL 15 μmol/L) = 3,34 (note : 15 μmol/L de = μL 15 pmol/) ;

En résumé, le volume auquel l'adaptateur peut être ajouté est le μL 3,4. (Note : Le volume maximum d'addition de l'adaptateur ne dépasse pas le μL 5).

Expédition et stockage

Le produit est embarqué avec des vessies de glace et peut être stocké à -20°C pendant deux années.

Définition d'unité

Dans un système de réaction de ligature de 20 μL, quand le μg 6 de λDNA-de derrièreⅢ est réagi à 16℃ pendant 30 minutes, la quantité d'enzyme exigée pour donner la ligature plus de 50% des fragments d'ADN a été définie en tant qu'une unité (u).

Précautions

1. La ligase d'ADN T4 est sensible à la dénaturation physique. En se mélangeant, inversez doucement le tube et secouez bien. Ne secouez pas vigoureusement ;

2. Des enzymes devraient être stockées dans une glacière ou sur un bain de glace une fois utilisées, et devraient être stockées à -20°C juste après l'utilisation ;

3. Ce produit est pour l'usage de recherches SEULEMENT !

4. Pour votre sécurité et santé, portez svp les manteaux de laboratoire et les gants jetables pour l'opération.

Si vous avez besoin de plus d'informations au sujet de cette ligase rapide d'ADN T4 (400 U/ΜL), entrez en contact svp avec nous, merci